目前,農(nóng)藥殘留分析方法很多,其中以色譜技術(shù)為主。常見(jiàn)色譜方法有氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法,新興色譜技術(shù)如免疫親合色譜法、凝膠滲透色譜法等。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)既具有氣相色譜高分離效能,又具有質(zhì)譜鑒定化合物結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)[1],可同時(shí)、、快速測(cè)定微量的多種農(nóng)藥殘留。 
　　 
　　1農(nóng)藥殘留的現(xiàn)狀及危害 
　　 
　　20世紀(jì)50年代以來(lái),化學(xué)合成農(nóng)藥在*的廣泛應(yīng)用,無(wú)疑在防治病蟲(chóng)害、鏟除雜草、增加農(nóng)業(yè)產(chǎn)量方面發(fā)揮了*的作用,對(duì)人類社會(huì)和生產(chǎn)力發(fā)展起到了巨大的促進(jìn)和推動(dòng)作用。但是農(nóng)藥是一類有毒化學(xué)物質(zhì),而且是人們主動(dòng)投放到環(huán)境中的[2],使用,對(duì)環(huán)境生物安全和人體健康產(chǎn)生了較大的不利影響。近年來(lái)因農(nóng)藥污染造成人和牲畜中毒的事件屢見(jiàn)報(bào)道,特別是蔬菜、水果類食品的中毒。目前,農(nóng)藥已成為世界上主要的污染源之一,田間噴灑的農(nóng)藥只有10%～30%粘附在作物上,其他大部分通過(guò)各種方式散播出去,污染大氣、土壤和水等[3]。 
　　 
　　2農(nóng)藥殘留分析技術(shù) 
　　 
　　農(nóng)藥殘留分析是對(duì)復(fù)雜混合物中痕量農(nóng)藥的母體化合物、有毒代謝物、降解產(chǎn)物和農(nóng)藥雜質(zhì)進(jìn)行的分析,是一種需要精細(xì)的微量操作手段和高靈敏度的痕量檢測(cè)技術(shù)[2]。隨著人們對(duì)食品、環(huán)境安全的日益關(guān)注以及新的、更高要求的農(nóng)藥殘留*的出臺(tái),農(nóng)藥殘留分析技術(shù)發(fā)展迅速。現(xiàn)代農(nóng)藥殘留分析技術(shù)通常包括樣品前處理和測(cè)定兩部分。 
　　2.1樣品前處理技術(shù) 
　　目前,已報(bào)道或已取得廣泛應(yīng)用的新技術(shù)主要有:固相萃取(SPE)、固相微萃取(SPME)、臨界流體提取(SFE)、加速溶劑萃取(ASE)、微波輔助萃取(MAE)等[4]。 
　　2.1.1固相萃取(SPE)。固相萃取是液固萃取和液相色譜柱技術(shù)相結(jié)合的發(fā)展,其基本原理是利用固體吸附劑對(duì)液體樣品中目標(biāo)化合物或雜質(zhì)的吸附,選用合適強(qiáng)度的洗脫溶劑,使目標(biāo)化合物選擇性地洗脫或保留在柱上,與樣品基體和干擾物分離,從而達(dá)到分離和富集的目的。固相萃取節(jié)省時(shí)間,可減少雜質(zhì)引入,對(duì)操作者安全,重現(xiàn)性好,同時(shí)對(duì)農(nóng)藥殘留物能夠快速富集。 
　　2.1.2固相微萃取(SPME)。固相微萃取是一種新型的無(wú)溶劑化樣品前處理技術(shù),由Pawliszyn在1989年報(bào)道。固相微萃取以特定的固體(一般為纖維狀萃取材料)作為固相提取器將其浸入樣品溶液或頂空提取,然后直接進(jìn)行GC、HPLC等分析[5]。該技術(shù)集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體,靈敏度高、成本低、所需樣品量少,重現(xiàn)性及線性好,操作簡(jiǎn)單、方便快捷。它通過(guò)吸附/脫吸附技術(shù),富集樣品中的揮發(fā)性和半揮發(fā)性成分,克服了一些傳統(tǒng)樣品處理技術(shù)的缺點(diǎn),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于水、食品、環(huán)境以及生物樣品分析。SPME技術(shù)在食品分析中的應(yīng)用很廣泛,如酒、果汁、蔬菜、肉、蛋等。還用于食品中其他一些有害殘留組分的分析上,如牛奶中的磺胺類和四環(huán)素類抗生素殘留;熏制火腿中的致癌物N-亞硝胺;谷物中丙烯酞胺殘留以及人乳中多氯聯(lián)苯及其他含氯有機(jī)化合物的分析等[6]。 
　　2.1.3臨界流體提取(SFE)。臨界流體(SCF)是臨界溫度(Tc)和臨界壓力(Pc)狀態(tài)下的高密度流體。臨界流體既具有液體對(duì)溶質(zhì)有較大溶解度,又具有氣體易于擴(kuò)散和運(yùn)動(dòng)的特點(diǎn)。由于臨界流體的粘度、密度、擴(kuò)散系數(shù)、溶劑化能力等性質(zhì)隨溫度和壓力變化很大[7],因此對(duì)選擇性的分離非常敏感。早在1879年,Hannay等就發(fā)現(xiàn)臨界乙醇流體對(duì)無(wú)機(jī)鹽固體具有顯著的溶解能力,但臨界萃取技術(shù)(SFE)卻是在近30年才迅速發(fā)展起來(lái)的一種新型物質(zhì)分離、精致技術(shù)[8]。付玉杰等[9]用SCF-CO2技術(shù)萃取甘草中甘草次酸,并與索氏提取法、聲法進(jìn)行了比較,提取率是索氏提取法的13倍、聲法的5倍,且溶劑用量小,周期短。目前,SFE已應(yīng)用于植物樣品、動(dòng)物組織、土壤、水等樣品中多種殺蟲(chóng)劑、殺菌劑和除草劑的萃取。 
　　2.1.4凝膠滲透色譜(GPC)。凝膠滲透色譜是一種快速凈化技術(shù),它是基于體積排阻的分離機(jī)理,通過(guò)具有分子篩性質(zhì)的固定相,用來(lái)分離相對(duì)分子質(zhì)量較小的物質(zhì),并且可以分析不同分子體積、具有相同化學(xué)性質(zhì)的高分子同系物。GPC現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析中脂類提取物與農(nóng)藥的分離,是含脂類食物樣品農(nóng)藥殘留分析的主要凈化手段[10]。陸繼偉等[11]經(jīng)冰浴聲提取,GPC凈化,測(cè)定了靈芝中24種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量,回收率在75.28%~117.18%,RSD在3.19%~15.57%,效果較好。 
　　2.1.5加速溶劑萃取(ASE)。加速溶劑萃取是在提高溫度(50～200℃)和壓力(1 000~3 000Pa)下用溶劑萃取固體或半固體樣品的新型樣品前處理方法。相比于其他萃取方法,ASE法具有快速、溶劑用量少、萃取效率高、安全等優(yōu)點(diǎn)[12],已被美國(guó)EPA收錄為處理固體樣品的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。ASE現(xiàn)已在環(huán)境、藥物、食品等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,特別是在殘留檢測(cè)方面,被用于土壤、動(dòng)植物組織、蔬菜和水果等樣品中的PCB、多環(huán)芳烴、有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑、苯氧基除草劑等有害物質(zhì)的萃取。 
　　2.1.6微波輔助萃取(MAE)。微波輔助萃取是微波和傳統(tǒng)的溶劑萃取法相結(jié)合后形成的一種新萃取方法。它是利用微波能來(lái)提高萃取速率的一種發(fā)展起來(lái)的技術(shù)。微波萃取具有設(shè)備簡(jiǎn)單、萃取效率高、重現(xiàn)性好、快速、節(jié)省試劑、污染小等優(yōu)點(diǎn),有較大的推廣價(jià)值。Onuska等[13]用多種溶劑從泥渣中微波提取有機(jī)氯農(nóng)藥殘留,實(shí)驗(yàn)僅用3.5min就獲取了索氏萃取法6h的結(jié)果。Lopez-Avila等[14]以乙烷-丙酮(體積比為1∶1)為溶劑,在115℃下從土壤中提取有機(jī)物,萃取15min,45種有機(jī)氯農(nóng)藥中的38種回收率在80%~120%,并證明用微波萃取法所得的有機(jī)氯農(nóng)藥的回收率比索氏萃取或聲波萃取法至少提高7%。 　2.2GC及GC-MS在樣品測(cè)定中的應(yīng)用 
　　2.2.1氣相色譜法(GC)。20世紀(jì)50年代農(nóng)藥殘留分析局限于化學(xué)法、比色法和生物測(cè)定法,檢測(cè)方法缺乏專一性,靈敏度也不高。60年代初氣相色譜開(kāi)始應(yīng)用于農(nóng)藥殘留分析,許多高靈敏度檢測(cè)器的使用,推動(dòng)了農(nóng)藥殘留分析技術(shù)的發(fā)展,大大提高了農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)精度。由于氣相色譜法具有分離效率高、分析速度快、選擇性好、樣品用量少、檢測(cè)靈敏度較高等優(yōu)點(diǎn),因此廣泛應(yīng)用于分離氣體和易揮發(fā)或可轉(zhuǎn)化為易揮發(fā)的液體及固體樣品。目前該方法已成為農(nóng)藥殘留分析中常用、主要的方法。 
　　氣相色譜儀的檢測(cè)器具有各種不同靈敏度和選擇性的種類,通過(guò)靈活應(yīng)用這些檢測(cè)器,可以用于各種試樣的分析。電子俘獲檢測(cè)器(ECD)可以實(shí)現(xiàn)多種有機(jī)氯、菊酯類農(nóng)藥的分離和測(cè)定;火焰光度檢測(cè)器(FPD)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥有很好的響應(yīng)值;氮磷檢測(cè)器(NPD)對(duì)氮、磷等化合物的響應(yīng)大大提高,成為測(cè)定有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥的有效檢測(cè)器[15]。 
　　王建華等[16]采用乙腈均質(zhì)提取,PSA固相萃取柱凈化,再用GC-ECD及FID檢測(cè)含硫蔬菜中的有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬除蟲(chóng)菊酯多類農(nóng)藥殘留組分,樣品的回收率在70%~110%,RSD為3.5%~14.2%。李慧冬等[17]將甘藍(lán)預(yù)制樣品經(jīng)高速勻漿法提取、弗羅里硅土層析柱凈化后用GC-ECD檢測(cè)啶蟲(chóng)脒的殘留量,外標(biāo)法定量,回收率為80.2%~99.8%,低檢出濃度為0.001mg/kg,測(cè)定結(jié)果的RSD不大于3.4%。宋家玉等[18]建立了食品和中藥中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留量的毛細(xì)管氣相色譜檢測(cè)方法。樣品經(jīng)有機(jī)溶劑聲提取,硫酸凈化,采用OV-1701毛細(xì)管柱,不分流進(jìn)樣,程序升溫分離,ECD檢測(cè),外標(biāo)法定量,平均回收率為84.3%~100.6%,RSD為1.28%~3.56%。任紅波[19]建立了氣相色譜檢測(cè)氟胺氰菊酯的方法。蜂蜜樣品用水溶解后,經(jīng)正己烷-二氯甲烷提取,提取液經(jīng)C18固相萃取小柱凈化,采用GCD-ECD測(cè)定,回收率在80%以上,檢出限為0.001 3mg/kg。呂芬等[20]用石油醚提取蔬菜、水果中痕量擬除蟲(chóng)菊酯,濃縮后經(jīng)Florisil固相萃取柱凈化,用氣相色譜-ECD測(cè)定,結(jié)果小白菜中的平均回收率為86.2%~93.4%,RSD為3.4%~8.6%;蘋(píng)果中的回收率為87.3%~92.8%,RSD為2.8%~8.1%。 
　　2.2.2氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)。將分離與高性能鑒定儀器組成聯(lián)用技術(shù),是20世紀(jì)末期儀器分析領(lǐng)域的重大技術(shù)進(jìn)展。其中,現(xiàn)代GC-MS聯(lián)用技術(shù)是目前技術(shù)成熟、普及應(yīng)用廣泛的一種聯(lián)用模式。 
　　質(zhì)譜法具有靈敏度高、定性能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),但要求進(jìn)樣要純,且定量分析較復(fù)雜。氣相色譜法則分離效率高,定量分析簡(jiǎn)便,但定性能力較差。因此,這2種方法聯(lián)用,可以相互取長(zhǎng)補(bǔ)短,既發(fā)揮色譜法的高分離能力,又發(fā)揮了質(zhì)譜法的高鑒別能力,適用于做多組分混合物中未知物的定性鑒定,可以判定化合物的分子結(jié)構(gòu)、測(cè)定未知組分的相對(duì)分子質(zhì)量、鑒定部分分離甚至未分離的色譜峰等。 
　　朱靜等[21]利用SPE對(duì)環(huán)境水中噻唑硫磷農(nóng)藥殘留進(jìn)行凈化,用GC-MS對(duì)其進(jìn)行測(cè)定,對(duì)環(huán)境水中噻唑硫磷的低檢測(cè)質(zhì)量濃度為56.4ng/L,加樣回收率大于85.5%,RSD小于4.42%,適用于環(huán)境水中痕量農(nóng)藥的監(jiān)測(cè)。Eiji Ueno等[22]首先用乙腈提取蔬菜中89種農(nóng)藥,鹽析后乙酸乙酯再溶解,共溶物自動(dòng)過(guò)凝膠色譜和活性碳串聯(lián)雙柱,之后再用氣質(zhì)聯(lián)用分析,回收率在70%~120%,RSD小于5%,方法已應(yīng)用到188種果蔬的日常檢測(cè)中。李云飛等[23]用GC-MS以選擇離子(SIM)檢測(cè)方式對(duì)果蔬類農(nóng)產(chǎn)品中含有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯及除蟲(chóng)菊酯類4類12種農(nóng)藥的殘留量進(jìn)行定性和定量分析,結(jié)果表明,方法回收率在80%~120%,變異系數(shù)在6%~20%。胡貝貞等[24]采用C18固相萃取小柱對(duì)啤酒中的有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行提取、凈化,用乙酸乙酯洗脫后供GC-MS分析。當(dāng)添加濃度為50μg/kg和100μg/kg時(shí),平均回收率為80.3% ~95.0%,RSD為1.97%~8.28%(n=6),方法的檢出限為1.20~15.3μg/kg。該方法可用于啤酒中痕量有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測(cè)定。趙鳳英等[25]以丙酮-石油醚(V/V=3∶1)為提取劑,采用聲波提取土壤中農(nóng)藥殘留,經(jīng)弗羅里硅土層析柱凈化,GC-MS以選擇離子監(jiān)測(cè)法同時(shí)測(cè)定土壤中多種有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,取得了較好的效果。在0.1、0.5μg/mL 2個(gè)質(zhì)量濃度添加水平的回收率分別為70.1%~119.0%和78.1%~119.0%,RSD分別為6.30%~9.80%和5.20%~8.23%。